Præsentation af tilfælde

En 43-årig kvinde med svær anæmi efter splenectomi, der tidligere var typebestemt som blodgruppe A, Rh (D) negativ, blev henvist til Immunohematology Reference Laboratory (IRL) of the Iranian Blood Transfusion Organization (IBTO), Teheran, Iran til ABO/Rh(D)-typebestemmelse og antistofscreeningstest med anmodning om to enheder RBC til transfusion i december 2013. Patientens sygehistorie afslørede tilbagevendende abort og abort uden anamnese for blodtransfusion. Hendes familiehistorie afslørede, at hendes forældre havde et consanguineous ægteskab, og hun havde fire søskende, som alle var i live uden nogen formodet blodsygdom, undtagen en af brødrene, der undergik splenectomi på grund af arvelig sfærecytoseanæmi. Hendes eneste tidligere barn var en sund og rask femtenårig dreng, som blev typebestemt og ikke blev bekræftet som Rhnull-fænotype. Koagulations- og hæmatologiske parametre var i normalområdet, bortset fra en meget lav hæmoglobinværdi på 3,2 g/dL.

Det blev observeret, at patientens serumplasma reagerede kraftigt i antistofpanelets celler, hvilket gav 4 + makroskopisk i 37℃ fase og i anti-humanglobulinfasen. Autokontroltestresultatet var negativt. Direkte anti-globulintest (DAT) var positiv (1+) med differentiel anti- IgG negativ og anti-C3d positiv (1+).

Disse resultater tyder på tilstedeværelsen af klinisk signifikante alloantistoffer mod flere negative antigener eller et antigen med høj prævalens. Et resultat af en antistofscreeningstest var negativt for patientens bror. Et hjemmefremstillet tilgængeligt trecellet antigenpanel (IBTO-minipanel) blev anvendt til antistofscreeningsproceduren, hvor patientens plasma blev tilsat RBC’er uden papainenzym ved hjælp af saltvand med lav ionisk styrke (LISS). IBTO mini-3cellepanelet og antistofidentifikationssættet 11celle og også udvalgte celler blev valideret inden for den toårige periode ved hjælp af kommercielle CE-mærkede Diamed-kits. Antistofscreeningstesten blev udført to gange parallelt ved hjælp af IBTO-producerede kits og Diamed-kits. Resultaterne blev sammenlignet, og i tilfælde af positive resultater blev 11cells antistofidentifikationspanelet fra Diamed Company anvendt samtidig med IBTO’s 11cells antistofidentifikationspanel. IBTO’s hjemmelavede antistof-ID-panel og udvalgte celler blev anvendt til at udelukke og inkludere alloantistoffer.

Søjleagglutinationsmetoden med antiglobulin-gelkort (INVITROGEL AHG coombs-Germany) blev anvendt til antistofscreeningtesten. Gelkortene blev inkuberet ved 37 °C i 15 minutter, hvorefter de blev centrifugeret i 10 minutter. Der blev anvendt standardrørmetoder (Bio-Rad AHG- Tyskland) til identifikation af antistoffer og test af udvalgte celler.

Klinisk signifikante alloantistoffer blev defineret som de antistoffer, der potentielt kunne forårsage RBC-destruktion baseret på reaktiviteten ved 37 °C og/eller anti-humanglobulin (AHG)-fasen.

Patientens og hendes brors udvidede fænotypebestemmelse viste, at de var negative for D, C, E, c, e RBC-antigener, hvilket indikerede, at de var stærkt mistænkt for at være den sjældne Rhnull-fænotype.

Adsorptions- og elueringsundersøgelser i Anti-human globulin (AHG, CE- Immunodiagnostika, Am Seerain 13 Germany, Eschelbronn) afslørede ikke tilstedeværelsen af D, C, E, c, e, RBC-antigener i det blod, der blev udtaget fra begge patienter. Vi foretog Rh-fænotyping med to antisera-kilder (Diagast 251/AV.AVINEE- 59120 Loos, Frankrig og CE- Immunodiagnostika, Am Seerain 13 Germany, Eschelbronn). Der blev udført positive og negative kontroltests for hvert antigen i overensstemmelse med producentens anbefalinger. På baggrund af disse samlede resultater fortolkede vi disse resultater som værende stærkt suggestive for Rhnull-fænototypen med en klinisk signifikant anti-Rh29 identificeret i serum fra den kvindelige patient, hvis data er vist i tabel 1.

Kompatibilitetstest viste, at serum fra den kvindelige patient ikke var reaktivt med hendes bror. Der blev indsamlet to enheder af RBC fra broderen inden for en 10-dages periode. Hun blev transfusioneret med RBC-enhederne og har aldrig haft behov for nogen transfusion siden den dato. Hendes bror donerede yderligere to enheder af RBC i 2014 og 2015. Kryokonservering blev også udnyttet til fremtidig brug.