RNA polymerase (Pol) I (en af tre eukaryote nukleare RNA polymeraser) er dedikeret til transkriptionen af de ribosomale DNA-gener, som findes i flere kopier i alle eukaryote celler. Disse gener koder for den store ribosomale RNA-prækursor, som derefter forarbejdes til de tre største underenheder af det ribosomale RNA, 18S-, 28S- og 5,8S-RNA’erne. I menneskelige celler er rDNA-genklyngerne lokaliseret på den korte arm af de fem par af de akrocentriske kromosomer. Promotoren for rRNA har to essentielle og særligt adskilte sekvenser: et CORE-element og et opstrøms kontrolelement (UCE, også kaldet UPE). CORE-elementet i den menneskelige promotor overlapper med transkriptionens startsted, der strækker sig fra 20 til 45, og er nødvendigt for specifik initiering af transkriptionen.
Polymerasen er et multisubunitkompleks, der består af to store underenheder (de mest bevarede dele omfatter det katalytiske sted, der deler lighed med andre eukaryote og bakterielle multisubunit RNA-polymeraser) og en række mindre underenheder. Under en række eksperimentelle betingelser er kernen kompetent til at formidle ribonukleinsyresyntese, in vivo kræver den imidlertid yderligere faktorer for at vælge den passende skabelon. Hos mennesker er RNA-transkriptet (45S) ca. 13.000 nukleotider langt. Inden 45S-rRNA’et forlader kernen som sammensatte ribosomale partikler, spaltes det for at give en kopi af 28S-rRNA’et, 18S-rRNA’et og 5,8S-rRNA’et hver. Der produceres lige store mængder af de tre rRNA’er ved indledningsvis at transskribere dem som ét transkript.