METHODEN

Patienten im Alter von 1-79 Jahren wurden prospektiv in der Marshfield Clinic in Marshfield, Wisconsin, rekrutiert, wenn sie während der Grippesaison wegen akuter Atemwegserkrankungen einen Arzt aufsuchten. Die Patienten kamen für die Grippetests in Frage, wenn sie über Fieber, Schüttelfrost oder Husten von <120 Stunden (5 Tagen) Dauer berichteten. Vor der Teilnahme an der Studie wurden die Patienten von einem Gesundheitsdienstleister untersucht, der in keinem Zusammenhang mit der Studie stand. Aus ethischen Gründen wurde die Studienteilnahme auf Patienten beschränkt, die untersucht wurden und denen keine antivirale Therapie verschrieben wurde.

Nach der schriftlichen Einwilligung nach Aufklärung entnahm ein Forschungskoordinator einen Nasen- oder Nasopharyngealabstrich für Influenza-Tests mittels Antigen-Schnelltest (2007-2008) und/oder Reverse-Transkriptions-Polymerase-Kettenreaktion (RT-PCR) in Echtzeit (alle Jahreszeiten). Die Reverse-Transkriptions-PCR wurde vor Ort unter Verwendung der Primer und Sonden der Centers for Disease Control and Prevention durchgeführt. Die Ergebnisse des Schnelltests und der RT-PCR lagen in der Regel innerhalb von 4 bzw. 24 Stunden vor. Positive Schnelltests wurden durch RT-PCR bestätigt. Die Patienten wurden randomisiert, um Oseltamivir oder Placebo in einem Verhältnis von 2:1 zu erhalten, und die Behandlung wurde so bald wie möglich nach dem ersten positiven Ergebnis eingeleitet.

Personen >88 Pfund erhielten eine 75-mg-Oseltamivir- oder eine identische Placebokapsel zweimal täglich für 5 Tage (10 Dosen). Kinder ≤88 Pfund erhielten eine flüssige Form von Oseltamivir in einer Konzentration von 15 mg/ml oder Placebo in der Standarddosis für das Gewicht. Für Kapsel- und Suspensionsformulierungen wurden getrennte Randomisierungstabellen verwendet, und in 6er-Blöcken wurden nach dem Zufallsprinzip fortlaufende Nummern dem Wirkstoff oder dem Placebo zugewiesen. Die Studienmedikamente wurden im Voraus entsprechend der Randomisierungstabelle zubereitet und mit der fortlaufenden Randomisierungsnummer vorbeschriftet. Die Compliance wurde überwacht, indem die Teilnehmer gebeten wurden, jede eingenommene Dosis beim Ausfüllen der unten beschriebenen Symptomberichte anzugeben.

Zusätzliche Abstriche wurden unmittelbar vor (Tag 0) und an Tag 3 oder 4 nach Beginn der Studie entnommen. Nur wenige Teilnehmer waren kulturpositiv; daher verwendeten wir den RT-PCR-Nachweis, um eine ungefähre Aussage über die Virusausscheidung zu machen, da virale Nukleinsäure auch ohne infektiöses Virus nachweisbar sein kann.

Jeder randomisierte Teilnehmer (oder Betreuer) füllte jeden Morgen und jeden Abend eine Symptomumfrage per Telefon oder sicher online aus. Die Berichterstattung wurde für mindestens 7 Tage nach Beginn der Behandlung mit dem Studienmedikament oder bis zum Abklingen der Symptome (bis zu 14 Tage) fortgesetzt. Die Teilnehmer erhielten ein digitales Mundthermometer und wurden angewiesen, morgens und abends ihre Temperatur zu messen und aufzuzeichnen. Für jeden Berichtszeitraum gaben die Teilnehmer Symptome wie Fieber, Husten, Müdigkeit, verstopfte Nase, Keuchen, Kopf- und Muskelschmerzen sowie Halsschmerzen auf einer Skala von 0 (nicht vorhanden) bis 3 (schwer) an. Die Bewertung der Symptome reichte von 0 (alle Symptome fehlen) bis 24 (alle Symptome sind schwer). Kopf-, Hals- und Muskelschmerzen wurden bei Kindern im Alter von <24 Monaten nicht erfasst, da die Eltern diese Symptome nicht zuverlässig angeben konnten. Die Verwendung von abschwellenden Mitteln, Hustenmitteln oder fiebersenkenden Mitteln wurde täglich erfasst.

Die Studie wurde ursprünglich für einen Zeitraum von zwei Jahren (2007-2008 und 2008-2009) finanziert und sollte 525 Patienten aufnehmen und randomisieren. Mit dieser Stichprobengröße sollte eine 80-prozentige Power erreicht werden, um eine Verkürzung der Krankheitsdauer um 0,6 Tage und eine Verringerung der Virusausscheidung um 1,2 Tage bei Oseltamivir-Patienten im Vergleich zu Placebo-Patienten, die 48-119 Stunden nach Krankheitsbeginn mit der Behandlung begannen, nachzuweisen. Aufgrund unvorhergesehener Ereignisse erstreckte sich die Rekrutierung über vier Saisons, und die angestrebte Stichprobengröße wurde nicht erreicht. In der zweiten Saison (2008-2009) wurde die Rekrutierung im Februar aufgrund der hohen Prävalenz von Oseltamivir-resistenten Influenzaviren ausgesetzt. Die Einschreibungen von 2008 bis 2009 wurden von dieser Analyse ausgeschlossen, und die beschreibenden Ergebnisse wurden separat veröffentlicht. Im Jahr 2009-2010 trat die H1N1-Pandemie im Oktober-November auf, bevor die Studie zur Aufnahme von Teilnehmern bereit war; nach Beginn der Studienaufnahme Anfang Dezember war die Influenza nahezu verschwunden. In den Jahren 2010-2011 wurde die Rekrutierung mitten in der Saison wegen des Auslaufens der Finanzierung ausgesetzt. Diese Studie wurde vom Institutional Review Board der Marshfield Clinic genehmigt und bei clinicaltrials.gov registriert (NCT00555893).

Intention-to-treat-Analyse wurde verwendet, um die Ergebnisse unter den Teilnehmern mit RT-PCR-bestätigter Influenza zu bewerten, die nach dem Zufallsprinzip einer Behandlungsgruppe <120 Stunden nach Krankheitsbeginn zugewiesen wurden, ≥1 Dosis des zugewiesenen Medikaments einnahmen und ≥1 Symptomerhebung ausfüllten. Alle Analysen wurden vor der Enttarnung spezifiziert und auf der Grundlage der Randomisierung/des Beginns der Behandlung im Verhältnis zur Krankheitsdauer stratifiziert: frühe Behandlung (Krankheitsdauer <48 Stunden) und späte Behandlung (Krankheitsdauer 48-119 Stunden). Kaplan-Meier-Analysen wurden durchgeführt, um die Zeit bis zum Verschwinden der Symptome und die PCR-Positivität an Tag 3-4 nach der Randomisierung zu untersuchen. Das Verschwinden der Symptome wurde als Beginn der ersten 24-Stunden-Periode definiert, in der der Gesamtsymptomwert ≤2 war und kein Symptom höher als leicht eingestuft wurde (Symptomwert von ≤1). Die Definition der Symptombehebung wurde vor der Analyse gegenüber dem ursprünglichen Protokoll, das den Gesamtsymptomwert nicht berücksichtigte, leicht abgeändert. Die Zeit bis zum Verschwinden der Symptome wurde vom Zeitpunkt der Randomisierung bis zum Verschwinden der Symptome in 12-Stunden-Schritten berechnet. Die Überlebenskurven der einzelnen Behandlungsgruppen wurden anhand von Log-Rank-Tests verglichen, und Vergleiche des Überlebens zu bestimmten Zeitpunkten wurden mit den von Klein und Moeschberger beschriebenen Methoden durchgeführt. Die Ereignisse wurden am letzten gemeldeten Erhebungszeitraum oder 14 Tage nach der Randomisierung zensiert, je nachdem, was zuerst eintrat.

Für einige Teilnehmer (n = 16) standen nach der Randomisierung keine Proben für PCR-Tests zur Verfügung, und einige (n = 4) hatten zwischen der Randomisierung und Tag 3-4 nach der Randomisierung mehrfach Proben abgegeben. Um den Virusnachweis in den beiden Behandlungsgruppen zu bewerten, untersuchten wir die geschätzte Wahrscheinlichkeit einer RT-PCR-Positivität an Tag 3-4 nach der Randomisierung. Den Teilnehmern wurde ein Time-to-Event-Wert von 3,5 zugewiesen, wenn sie an Tag 3 oder 4 ein negatives (nicht bestandenes) oder positives (zensiertes) PCR-Ergebnis hatten. Die Wahrscheinlichkeit einer PCR-Positivität an Tag 3-4 wurde auf der Grundlage der Überlebensfunktion zum Zeitpunkt 3,5 berechnet.

Die Wirkung der Behandlung auf den subjektiven Schweregrad der Symptome wurde anhand eines maximalen und eines mittleren Schweregrads bewertet. Der mittlere Schweregrad wurde für jeden Teilnehmer berechnet, indem die Werte für den Schweregrad der Symptome für alle Berichtszeiträume von der Randomisierung bis zum ersten Zeitraum des Verschwindens der Symptome addiert und durch die Anzahl der Berichtszeiträume geteilt wurden. Kinder im Alter von <24 Monaten (n = 5) wurden von der Analyse der Krankheitsschwere ausgeschlossen, da sie nicht gebeten wurden, alle Symptome zu berichten.