Gevalpresentatie

Een 43-jarige vrouw met ernstige anemie na splenectomie die eerder getypeerd was als bloedgroep A, Rh (D) negatief, werd doorverwezen naar het Immunohematology Reference Laboratory (IRL) van de Iranian Blood Transfusion Organization (IBTO), Teheran, Iran voor ABO / Rh (D) typering en antilichaam screening test met een verzoek voor twee eenheden RBC voor transfusie in december 2013. De medische voorgeschiedenis van de patiënte onthulde recurrente abortus en miskraam met geen voorgeschiedenis van bloedtransfusie. Haar familiegeschiedenis onthulde dat haar ouders een consanguine huwelijk hadden en dat zij vier broers en zussen had, die allen in leven waren zonder enige vermoedelijke bloedaandoening, behalve een van de broers die een splenectomie onderging vanwege hereditaire sferocytose anemie. Haar enige eerdere kind was een gezonde vijftienjarige jongen, die werd getypeerd en niet werd bevestigd als Rhnull fenotype. Coagulatie en hematologie parameters waren in het normale bereik, met uitzondering van zeer lage hemoglobine van 3,2 g/dL.

Het werd waargenomen dat het serumplasma van de patiënt sterk reageerde in de cellen van het antilichaampanel, wat 4 + macroscopisch gaf in de 37℃ fase en in de anti-humaan globuline fase. Het resultaat van de autocontroletest was negatief. Directe anti-globuline test (DAT) was positief (1+) met differentiële anti-IgG negatief en anti-C3d positief (1+).

Deze resultaten suggereerden de aanwezigheid van klinisch significante alloantilichamen tegen meerdere negatieve antigenen of een antigeen met hoge prevalentie. Een antilichaamscreeningstestresultaat was negatief voor de broer van de patiënt. Voor de antilichaamscreeningsprocedure werd een zelfgemaakt beschikbaar driecellig antigeen-panel (IBTO-minipanel) gebruikt, waarbij het plasma van de patiënt aan RBC’s werd toegevoegd zonder papaïne-enzym met behulp van de Low Ionic Strength Saline (LISS). IBTO mini-3-cellenpanel en antilichaamidentificatie 11-cellenkit en ook geselecteerde cellen werden binnen de periode van twee jaar gevalideerd met commerciële CE-gemerkte Diamed-kits. De antilichaamscreeningstest werd tweemaal parallel uitgevoerd met gebruikmaking van door IBTO geproduceerde kits en Diamed kits. De resultaten werden vergeleken en in het geval van positieve resultaten werd het 11cells antilichaam ID panel van Diamed Company gelijktijdig gebruikt met het IBTO 11cells antilichaam ID panel. IBTO zelfgemaakt antilichaam ID-panel en geselecteerde cellen werden gebruikt om alloantilichamen uit te sluiten en op te nemen.

Kolomagglutinatiemethode met antiglobuline gelkaart (INVITROGEL AHG coombs-Duitsland) werd gebruikt voor de antilichaam screening test. De gelkaarten werden gedurende 15 minuten bij 37 °C geïncubeerd en vervolgens gedurende 10 minuten gecentrifugeerd. Standaardbuismethoden (Bio-Rad AHG-Duitsland) werden gebruikt voor antilichaamidentificatie en geselecteerde celtests.

Klinisch significante alloantilichamen werden gedefinieerd als die antilichamen die mogelijk RBC-destructie zouden kunnen veroorzaken op basis van de reactiviteit bij 37 °C en/of de anti-humaan globuline (AHG)-fase.

Uit de uitgebreide fenotypering van de patiënte en haar broer bleek dat zij negatief waren voor D, C, E, c, e RBC-antigenen, wat erop wijst dat zij sterk verdacht waren het zeldzame Rhnull fenotype te zijn.

Adsorptie- en elutieonderzoeken in Anti-humaan Globuline (AHG, CE- Immunodiagnostika, Am Seerain 13 Germany, Eschelbronn) brachten geen aanwezigheid van D, C, E, c, e, RBC-antigenen aan het licht in het bloed dat van beide patiënten was afgenomen. We voerden Rh fenotypering uit met twee bronnen van antisera (Diagast 251/AV.AVINEE- 59120 Loos, Frankrijk en CE- Immunodiagnostika, Am Seerain 13 Germany, Eschelbronn). Voor elk antigeen werden positieve en negatieve controletests uitgevoerd volgens de aanbevelingen van de fabrikant. Op basis van deze collectieve bevindingen interpreteerden wij deze resultaten als zijnde sterk suggestief voor het Rhnull fenotype met een klinisch significant anti-Rh29 geïdentificeerd in serum van de vrouwelijke patiënte wier gegevens zijn weergegeven in tabel 1.