Presentación del caso

Una mujer de 43 años con anemia severa tras una esplenectomía previamente tipificada como grupo sanguíneo A, Rh (D) negativo, fue remitida al Laboratorio de Referencia de Inmunohematología (IRL) de la Organización Iraní de Transfusión de Sangre (IBTO), Teherán, Irán, para la tipificación ABO / Rh (D) y la prueba de detección de anticuerpos con una solicitud de dos unidades de glóbulos rojos para transfusión en diciembre de 2013. El historial médico de la paciente reveló abortos recurrentes y abortos espontáneos sin antecedentes de transfusiones de sangre. Sus antecedentes familiares revelaron que sus padres tenían un matrimonio consanguíneo y que ella tenía cuatro hermanos, todos vivos sin ningún trastorno sanguíneo sospechoso, excepto uno de los hermanos que fue sometido a una esplenectomía debido a una anemia hereditaria por esferocitosis. Su único hijo anterior era un niño sano de quince años, al que se le realizó el tipaje y no se confirmó el fenotipo Rhnull. Los parámetros de coagulación y hematología estaban en el rango normal, excepto la hemoglobina muy baja de 3,2 g/dL.

Se observó que el plasma sérico del paciente reaccionó fuertemente en las células del panel de anticuerpos, dando 4 + macroscópicos en la fase 37℃ y en la fase de globulina antihumana. El resultado de la prueba de autocontrol fue negativo. La prueba de antiglobulina directa (DAT) fue positiva (1+) con anti IgG diferencial negativo y anti-C3d positivo (1+).

Estos resultados sugerían la presencia de aloanticuerpos clínicamente significativos contra múltiples antígenos negativos o un antígeno de alta prevalencia. El resultado de la prueba de detección de anticuerpos fue negativo para el hermano de la paciente. Para el procedimiento de cribado de anticuerpos se utilizó un panel de antígenos de tres celdas disponible en casa (minipanel IBTO) en el que el plasma del paciente se añadió a los glóbulos rojos sin la enzima papaína utilizando la solución salina de baja fuerza iónica (LISS). El panel IBTO mini-3cell y el kit de identificación de anticuerpos 11cell, así como las células seleccionadas, se validaron en el periodo de dos años utilizando kits comerciales Diamed con marca CE. La prueba de detección de anticuerpos se realizó dos veces en paralelo utilizando los kits producidos por IBTO y los kits de Diamed. Los resultados fueron comparados y en caso de resultados positivos, el panel de identificación de anticuerpos de 11 células de la compañía Diamed fue utilizado simultáneamente con el panel de identificación de anticuerpos de 11 células de la IBTO. Se utilizó el panel de identificación de anticuerpos casero de IBTO y las células seleccionadas para excluir e incluir los aloanticuerpos.

Para la prueba de detección de anticuerpos se utilizó el método de aglutinación en columna con tarjeta de gel antiglobulina (INVITROGEL AHG coombs-Alemania). Las tarjetas de gel se incubaron a 37 °C durante 15 minutos y luego se centrifugaron durante 10 minutos. Para la identificación de anticuerpos y las pruebas de células seleccionadas se utilizaron métodos de tubo estándar (Bio-Rad AHG- Alemania).

Los aloanticuerpos clínicamente significativos se definieron como aquellos anticuerpos que potencialmente podrían causar la destrucción de los glóbulos rojos basándose en la reactividad a 37 °C y/o en la fase de globulina antihumana (AHG).

El fenotipo ampliado de la paciente y de su hermano mostró que eran negativos para los antígenos RBC D, C, E, c, e, indicando que eran fuertemente sospechosos de ser el raro fenotipo Rhnull.

Los estudios de adsorción y elución en la globulina antihumana (AHG, CE- Immunodiagnostika, Am Seerain 13 Germany, Eschelbronn) no revelaron la presencia de antígenos RBC D, C, E, c, e, en la sangre obtenida de ambos pacientes. Se realizó la fenotipificación del Rh con dos fuentes de antisueros (Diagast 251/AV.AVINEE- 59120 Loos, Francia y CE- Immunodiagnostika, Am Seerain 13 Alemania, Eschelbronn). Se realizaron pruebas de control positivo y negativo para cada antígeno según las recomendaciones del fabricante. Basándonos en estos hallazgos colectivos, interpretamos estos resultados como fuertemente sugestivos del fenotipo Rhnull con un anti-Rh29 clínicamente significativo identificado en el suero de la paciente femenina cuyos datos se muestran en la Tabla 1.

Las pruebas de compatibilidad mostraron que el suero de la paciente no era reactivo con su hermano. Se recogieron dos unidades de glóbulos rojos del hermano en un período de 10 días. La paciente fue transfundida con las unidades de glóbulos rojos y no necesitó ninguna transfusión desde esa fecha. Su hermano donó dos unidades más de glóbulos rojos en 2014 y 2015. También se utilizó la criopreservación para su uso futuro.