Hänen isänsä Thomas Vreeland Jones oli rakennusmestari, josta tuli myöhemmin lakimies; hänen äitinsä Carolyn Jones oli kosmetologi.
Jonesin vanhemmat rohkaisivat häntä piirtämään ja maalaamaan lapsena vesiväreillä. Lapsuuden aikana hänen äitinsä vei hänet ja hänen veljensä Martha’s Vineyardiin, jossa hänestä tuli elinikäinen ystävä kirjailija Dorothy Westin kanssa. Hän kävi High School of Practical Artsin Bostonissa. Samaan aikaan hän kävi Bostonin taidemuseon iltakursseja ja työskenteli pukusuunnittelijan oppipoikana. Hän piti ensimmäisen yksityisnäyttelynsä 17-vuotiaana. Vuosina 1923-1927 hän opiskeli muotoilua Bostonin Museum of Fine Artsin koulussa ja kävi iltakursseja Bostonin normaalissa taidekoulussa. Hän opiskeli myös Design Art Schoolissa ja Harvardin yliopistossa. Hän jatkoi kouluttautumistaan myös työnsä aloittamisen jälkeen käymällä kursseja Columbian yliopistossa ja suorittamalla kandidaatin tutkinnon Howardin yliopistossa vuonna 1945, josta hän valmistui magna cum laude.
Vuonna 1934 Jones tapasi Louis Vergniaud Pierre-Noelin, josta tulisi merkittävä haitilainen taiteilija, kun molemmat olivat jatko-opiskelijoita Columbian yliopistossa. He kävivät kirjeenvaihtoa lähes kahdenkymmenen vuoden ajan ennen kuin menivät naimisiin Etelä-Ranskassa vuonna 1953. Jones ja hänen miehensä asuivat Washingtonissa ja Haitissa. Heillä ei ollut lapsia. Mies kuoli vuonna 1982.
1930-luvun alussa Jones piti näyttelyitä William E. Harmon Foundationin ja muiden instituutioiden kanssa, tuotti näytelmiä ja draamallisia esityksiä ja alkoi tutkia eri kulttuurien naamioita. Vuonna 1937 hän sai stipendin opiskelemaan Pariisiin Académie Julianiin. Vuoden aikana hän tuotti yli 30 akvarellia. Hän palasi Howardin yliopistoon ja alkoi opettaa akvarellimaalausta. Hän sanoi Pariisissa viettämästään ajasta:
Ranskalaiset olivat niin inspiroivia. Ihmiset seisoivat ja katselivat minua ja sanoivat: ”Mademoiselle, olette niin lahjakas. Olette niin ihana.’ Toisin sanoen ihonvärilläni ei ollut väliä Pariisissa, ja se oli yksi tärkeimmistä syistä, joiden vuoksi luulen, että minua rohkaistiin ja aloin todella pitää itseäni lahjakkaana.”
Vuonna 1938 hän valmisti Les Fétiches -teoksen (1938), joka on huikean afrikkalaisvaikutteisen öljyväriteoksen, jonka Smithsonian American Art Museum omistaa.Jonesin Les Fétiches -teos vaikutti ratkaisevalla tavalla siihen, että ”négritude”, joka on selkeästi frankofonien taideilmiö, siirtyi kirjallisuuden piiristä visuaaliseen kuvastoon. Jonesin teos tarjosi tärkeän visuaalisen yhteyden Négritude-kirjailijoihin, kuten Aimé Césaireen, Léon Damasiin ja Léopold Sédar Senghoriin. Se oli yksi hänen tunnetuimmista teoksistaan ja hänen ensimmäinen teoksensa, jossa yhdistettiin perinteisiä afrikkalaisia muotoja länsimaisiin tekniikoihin ja materiaaleihin ja luotiin elinvoimainen ja kiehtova teos. Hän sai valmiiksi myös Pariisilaisen kerjäläisnaisen, jonka tekstin toimitti Langston Huges.
Hänen tärkein inspiraationsa lähde oli Céline Marie Tabary, joka oli myös taidemaalari ja jonka kanssa hän työskenteli useita vuosia. Tabary toimitti Jonesin maalauksia harkittavaksi tuomariston palkintoihin, sillä afroamerikkalaisten taiteilijoiden teoksia ei aina hyväksytty. Jones matkusti paljon Tabaryn kanssa, muun muassa Etelä-Ranskassa, ja he maalasivat usein toisiaan. He opettivat yhdessä taidetta 1940-luvulla.
Lois Mailou Jones mainitsi Tabaryn myötävaikuttaneen hänen saamiinsa tunnustuksiin ja huomautti, että Tabary vei hänen maalauksiaan tuomaristoihin, kun Jones ei pystynyt siihen afroamerikkalaisten osallistumista estävän politiikan vuoksi. Nämä osallistumiset olivat merkittäviä värimuurin murtamisessa Corcoranin galleriassa vuonna 1941.