METHODS

1-79-vuotiaat potilaat rekrytoitiin prospektiivisesti Marshfield Cliniciin Marshfieldissä, Wisconsinissa, jos he hakeutuivat lääkärin vastaanotolle akuutin hengitystiesairauden vuoksi influenssakauden aikana. Potilaat kelpuutettiin influenssatestiin, jos he ilmoittivat kuumeilua, vilunväristyksiä tai yskää, jonka kesto oli <120 tuntia (5 päivää). Ennen osallistumista potilaat arvioi terveydenhuollon tarjoaja, jolla ei ollut yhteyttä tutkimukseen. Eettisistä syistä tutkimukseen osallistuminen rajoitettiin potilaisiin, jotka oli arvioitu ja joille ei ollut määrätty viruslääkehoitoa.

Kirjallisen tietoon perustuvan suostumuksen antamisen jälkeen tutkimuskoordinaattori keräsi nenästä tai nenänielusta pyyhkäisynäytteen influenssan testausta varten nopealla antigeenitestillä (kaudella 2007-2008) ja/tai reaaliaikaisella käänteistranskriptiopolymeraasiketjureaktiolla (RT-PCR) (kaikkina kausina). Käänteistranskriptio-PCR suoritettiin paikallisesti käyttäen Centers for Disease Control and Preventionin alukkeita ja koettimia . Pikatestin ja RT-PCR:n tulokset olivat yleensä saatavilla 4 ja 24 tunnin kuluessa. Positiiviset pikatestit vahvistettiin RT-PCR:llä. Potilaat satunnaistettiin saamaan oseltamiviiriä tai lumelääkettä suhteessa 2:1, ja hoito aloitettiin mahdollisimman pian ensimmäisen positiivisen tuloksen jälkeen.

Potilaat >88 kiloa saivat 75 mg:n oseltamiviirikapselin tai identtisen lumelääkekapselin kahdesti vuorokaudessa 5 päivän ajan (10 annosta). Lapset ≤88 kiloa saivat nestemäistä oseltamiviiriä pitoisuudella 15 mg/ml tai lumelääkettä painon mukaisella vakioannoksella. Kapseli- ja suspensiovalmisteille käytettiin erillisiä satunnaistustaulukoita, ja juoksevat numerot satunnaistettiin vaikuttavalle lääkkeelle tai lumelääkkeelle kuuden hengen lohkoissa. Tutkimuslääkkeet valmistettiin etukäteen satunnaistustaulukon mukaisesti ja merkittiin etukäteen juoksevalla satunnaistamisnumerolla. Vaatimustenmukaisuutta seurattiin pyytämällä osallistujia ilmoittamaan jokainen otettu annos jäljempänä kuvattujen oirekertomusten täyttämisen yhteydessä.

Lisäiset pyyhkäisynäytteet kerättiin välittömästi ennen (päivä 0) ja kolmantena tai neljäntenä päivänä tutkimuslääkkeen aloittamisen jälkeen. Harvat osallistujat olivat viljelypositiivisia; siksi käytimme RT-PCR-tunnistusta viruksen irtoamisen arvioimiseksi, koska viruksen nukleiinihappo voi olla havaittavissa ilman infektiivistä virusta.

Jokainen satunnaistettu osallistuja (tai huoltaja) täytti oirekyselyn joka aamu ja ilta puhelimitse tai turvallisesti verkossa. Raportointia jatkettiin vähintään 7 päivän ajan tutkimuslääkkeen aloittamisen jälkeen tai kunnes oireet olivat hävinneet (enintään 14 päivää). Osallistujat saivat digitaalisen suulämpömittarin, ja heitä ohjeistettiin mittaamaan ja kirjaamaan lämpötilansa aamuin ja illoin. Kunkin raportointijakson aikana osallistujat ilmoittivat kuumeen, yskän, väsymyksen, nenän tukkoisuuden, hengityksen vinkumisen, päänsäryn, lihassäryn ja kurkkukivun oireet asteikolla 0:sta (ei lainkaan) 3:een (vaikea). Oireiden pistemäärät vaihtelivat välillä 0 (kaikki oireet puuttuvat) – 24 (kaikki oireet ovat vakavia). Päänsärkyä, kurkkukipua ja lihassärkyä ei arvioitu <24 kuukauden ikäisten lasten osalta, koska vanhemmat eivät pystyneet luotettavasti tunnistamaan näitä oireita. Dekongestanttien, yskänlääkkeiden tai kuumelääkkeiden käyttö ilmoitettiin päivittäin.

Tutkimus rahoitettiin alun perin kahdeksi vuodeksi (2007-2008 ja 2008-2009), ja tarkoituksena oli ottaa mukaan ja satunnaistaa 525 potilasta. Tämän otoskoon arvioitiin antavan 80 prosentin tehon havaita 0,6 päivän vähennys sairauden kestossa ja 1,2 päivän vähennys viruksen irtoamisessa oseltamiviiriä saaneilla verrattuna lumelääkkeeseen, jotka aloittivat hoidon 48-119 tuntia sairauden puhkeamisen jälkeen. Ennakoimattomien tapahtumien vuoksi rekrytointia jatkettiin neljän kauden ajan, eikä tavoiteltua otoskokoa saavutettu. Toisella kaudella (2008-2009) ilmoittautuminen keskeytettiin helmikuussa, koska oseltamiviirille resistenttejä influenssaviruksia esiintyi runsaasti. Vuosien 2008-2009 ilmoittautumiset jätettiin tämän analyysin ulkopuolelle, ja kuvailevat tulokset julkaistiin erikseen. Vuosina 2009-2010 H1N1-pandemia puhkesi loka-marraskuussa ennen kuin tutkimukseen ehdittiin ottaa osallistujia; influenssaa ei juuri esiintynyt sen jälkeen, kun tutkimukseen ilmoittautuminen alkoi joulukuun alussa. Vuosina 2010-2011 ilmoittautuminen keskeytettiin kesken kauden rahoituksen päättymisen vuoksi. Marshfield Clinicin institutionaalinen arviointilautakunta hyväksyi tämän tutkimuksen, ja se rekisteröitiin clinicaltrials.gov-sivustolle (NCT00555893).

Intention-to-treat-analyysia käytettiin tulosten arvioimiseksi niiden osallistujien keskuudessa, joilla oli RT-PCR:llä vahvistettu influenssa ja joille oli satunnaisesti määritetty hoitoryhmä <120 tuntia sairastumisen alkamisesta, jotka ottivat ≥1 annoksen määriteltyä lääkettä ja täyttivät ≥1 oirekyselyn. Kaikki analyysit täsmennettiin ennen peittämättä jättämistä ja ositettiin satunnaistamisen/lääkityksen aloittamisen perusteella suhteessa sairauden kestoon: varhainen hoito (sairauden kesto <48 tuntia) ja myöhäinen hoito (sairauden kesto 48-119 tuntia). Kaplan-Meier-analyyseillä tutkittiin aikaa oireiden häviämiseen ja PCR-positiivisuuteen 3-4 päivänä satunnaistamisen jälkeen. Oireiden häviäminen määriteltiin tapahtuvaksi ensimmäisen sellaisen 24 tunnin jakson alussa, jonka aikana oireiden kokonaispistemäärä oli ≤2 ja jossa yksikään oire ei ollut luokiteltu lievää korkeammaksi (oireiden pistemäärä ≤1). Oireiden häviämisen määritelmää muutettiin hieman ennen analyysia alkuperäisestä protokollasta, jossa ei otettu huomioon oireiden kokonaispistemäärää. Oireiden häviämiseen kulunut aika laskettiin satunnaistamisajankohdasta oireiden häviämiseen 12 tunnin välein. Kunkin hoitoryhmän eloonjäämiskäyriä verrattiin log-rank-testillä, ja eloonjäämisen vertailu tiettyinä ajankohtina tehtiin Kleinin ja Moeschbergerin kuvaamilla menetelmillä. Tapahtumat sensuroitiin viimeisenä raportoituna tutkimusjaksona tai 14 päivää satunnaistamisen jälkeen, riippuen siitä, kumpi tapahtui ensin.

Joidenkin osallistujien (n = 16) näytteitä PCR-testausta varten ei ollut saatavilla satunnaistamisen jälkeen, ja jotkut (n = 4) olivat toimittaneet näytteitä useaan otteeseen satunnaistamisen ja 3.-4. päivän välillä satunnaistamisen jälkeen. Arvioidaksemme viruksen havaitsemista kahdessa hoitoryhmässä tarkastelimme RT-PCR-positiivisuuden arvioitua todennäköisyyttä päivänä 3-4 satunnaistamisen jälkeen. Osallistujille annettiin aika-arvoksi 3,5, jos heillä oli negatiivinen (epäonnistunut) tai positiivinen (sensuroitu) PCR-tulos päivänä 3 tai 4. PCR-positiivisuuden todennäköisyys päivänä 3-4 laskettiin eloonjäämisfunktion perusteella ajanhetkellä 3,5.

Hoidon vaikutusta subjektiiviseen oireiden vaikeusasteeseen arvioitiin maksimi- ja keskiarvopisteytyksen avulla. Keskimääräinen vakavuuspistemäärä laskettiin kullekin osallistujalle laskemalla yhteen kaikkien raportointijaksojen oireiden vakavuuspisteet satunnaistamisesta ensimmäiseen oireiden korjaantumisjaksoon asti jaettuna raportointijaksojen lukumäärällä. <24 kuukauden ikäiset lapset (n = 5) jätettiin sairauden vakavuuden analyysin ulkopuolelle, koska heitä ei pyydetty ilmoittamaan kaikkia oireita.