METHODS

Pacjenci w wieku 1-79 lat byli prospektywnie rekrutowani w Marshfield Clinic w Marshfield, Wisconsin, jeśli szukali pomocy medycznej z powodu ostrej choroby układu oddechowego w sezonie grypowym. Pacjenci kwalifikowali się do testów na grypę, jeśli zgłaszali gorączkę, dreszcze lub kaszel trwający <120 godzin (5 dni). Przed przystąpieniem do badania pacjenci byli oceniani przez pracownika służby zdrowia bez związku z badaniem. Ze względów etycznych udział w badaniu był ograniczony do pacjentów, którzy zostali ocenieni i nie przepisano im terapii przeciwwirusowej.

Po uzyskaniu pisemnej świadomej zgody koordynator badań pobierał wymaz z nosa lub nosogardła w celu przeprowadzenia testów na grypę za pomocą szybkiego testu antygenowego (w latach 2007-2008) i / lub reakcji łańcuchowej polimerazy odwrotnej transkrypcji w czasie rzeczywistym (RT-PCR) (wszystkie sezony). PCR z odwrotną transkrypcją przeprowadzono lokalnie przy użyciu starterów i sond Centers for Disease Control and Prevention . Wyniki szybkich testów i RT-PCR były zazwyczaj dostępne odpowiednio w ciągu 4 i 24 godzin. Pozytywne wyniki szybkich testów były potwierdzane przez RT-PCR. Pacjenci zostali randomizowani do otrzymywania oseltamiwiru lub placebo w stosunku 2:1, a leczenie rozpoczęto tak szybko, jak to możliwe po początkowym pozytywnym wyniku.

Dzieci >88 funtów otrzymały kapsułkę 75 mg oseltamiwiru lub identycznego placebo dwa razy dziennie przez 5 dni (10 dawek). Dzieci ≤88 funtów otrzymywały płynną postać oseltamiwiru w stężeniu 15 mg/ml lub placebo w dawce standardowej dla wagi. Stosowano oddzielne tabele randomizacji dla preparatów w postaci kapsułek i zawiesiny, a kolejne numery były losowo przypisywane do aktywnego leku lub placebo w blokach po 6. Badane leki były przygotowywane z wyprzedzeniem zgodnie z tabelą randomizacji i wstępnie oznakowane kolejnym numerem randomizacji. Zgodność monitorowano, prosząc uczestników o zgłaszanie każdej przyjętej dawki podczas wypełniania raportów objawów, opisanych poniżej.

Dodatkowe wymazy pobierano bezpośrednio przed (dzień 0) i w dniu 3 lub 4 po rozpoczęciu badania leku. Niewielu uczestników uzyskało pozytywny wynik hodowli; dlatego do przybliżonego określenia wydalania wirusa zastosowaliśmy wykrywanie metodą RT-PCR, uznając, że wirusowy kwas nukleinowy może być wykrywalny przy braku zakaźnego wirusa.

Każdy randomizowany uczestnik (lub opiekun) codziennie rano i wieczorem wypełniał ankietę dotyczącą objawów przez telefon lub bezpiecznie online. Raportowanie trwało przez co najmniej 7 dni po rozpoczęciu stosowania leku badanego lub do czasu ustąpienia objawów (do 14 dni). Uczestnicy otrzymali cyfrowy termometr doustny i zostali poinstruowani, aby mierzyć i zapisywać swoją temperaturę rano i wieczorem. W każdym okresie sprawozdawczym uczestnicy zgłaszali objawy gorączki, kaszel, zmęczenie, niedrożność nosa, świszczący oddech, ból głowy, bóle mięśni i gardła w skali od 0 (brak) do 3 (ciężki). Punktacja objawów wahała się od 0 (wszystkie objawy nieobecne) do 24 (wszystkie objawy ciężkie). Ból głowy, ból gardła i bóle mięśni nie były oceniane u dzieci w wieku <24 miesięcy, ponieważ rodzice nie byli w stanie wiarygodnie określić tych objawów. Codziennie zgłaszano stosowanie leków znieczulających, przeciwkaszlowych i przeciwgorączkowych.

Badanie było pierwotnie finansowane przez okres 2 lat (2007-2008 i 2008-2009) z zamiarem włączenia do badania i randomizacji 525 pacjentów. Oszacowano, że ta wielkość próby zapewni 80% mocy do wykrycia skrócenia o 0,6 dnia czasu trwania choroby i zmniejszenia o 1,2 dnia wydalania wirusa wśród osób otrzymujących oseltamiwir w porównaniu z placebo, które rozpoczęły leczenie 48-119 godzin po wystąpieniu choroby. Ze względu na nieprzewidziane zdarzenia, rekrutacja została przedłużona na 4 sezony, a docelowa wielkość próby nie została osiągnięta. W drugim sezonie (2008-2009), rekrutacja została zawieszona w lutym z powodu wysokiej częstości występowania wirusów grypy opornych na oseltamiwir. Zapisy od 2008 do 2009 roku zostały wyłączone z tej analizy, a wyniki opisowe zostały opublikowane osobno . W latach 2009-2010 pandemia H1N1 wystąpiła w październiku-listopadzie, zanim badanie było gotowe do przyjęcia uczestników; grypa prawie nie występowała po rozpoczęciu zapisów do badania na początku grudnia. W latach 2010-2011 rekrutacja została zawieszona w połowie sezonu z powodu wygaśnięcia finansowania. Badanie zostało zatwierdzone przez Institutional Review Board w Marshfield Clinic i zarejestrowane w clinicaltrials.gov (NCT00555893).

Analizaention-to-treat została zastosowana do oceny wyników wśród uczestników z grypą potwierdzoną metodą RT-PCR, którzy zostali losowo przydzieleni do grupy leczonej <120 godzin od początku choroby, przyjęli ≥1 dawkę przypisanego leku i wypełnili ≥1 ankietę dotyczącą objawów. Wszystkie analizy zostały określone przed demaskowaniem i stratyfikowane w oparciu o randomizację/rozpoczęcie podawania leków w stosunku do czasu trwania choroby: wczesne leczenie (czas trwania choroby <48 godzin) i późne leczenie (czas trwania choroby 48-119 godzin). Przeprowadzono analizę Kaplana-Meiera w celu zbadania czasu do ustąpienia objawów i uzyskania dodatniej reakcji PCR w 3-4 dniu po randomizacji. Ustąpienie objawów definiowano jako wystąpienie na początku pierwszego 24-godzinnego okresu, w którym całkowita ocena objawów wynosiła ≤2, przy czym żaden objaw nie został oceniony jako wyższy niż łagodny (ocena objawów ≤1). Definicja ustąpienia objawów została nieznacznie zmodyfikowana, przed analizą, z pierwotnego protokołu, który nie uwzględniał całkowitej punktacji objawów. Czas do rozwiązania był obliczany od czasu randomizacji do rozwiązania objawów w odstępach 12-godzinnych. Krzywe przeżycia dla każdej grupy leczenia porównano za pomocą testów log-rank, a porównania przeżycia w określonych punktach czasowych podjęto przy użyciu metod opisanych przez Klein i Moeschberger . Zdarzenia zostały ocenzurowane w ostatnim zgłoszonym okresie badania lub 14 dni po randomizacji, w zależności od tego, co nastąpiło wcześniej.

Odcinki do badania PCR po randomizacji nie były dostępne dla niektórych uczestników (n = 16), a niektórzy (n = 4) dostarczyli próbki wielokrotnie między randomizacją a dniem 3-4 po randomizacji. Aby ocenić wykrywalność wirusa w 2 grupach leczenia, zbadaliśmy szacunkowe prawdopodobieństwo wyniku dodatniego RT-PCR w dniu 3-4 po randomizacji. Uczestnikom przypisano wartość czasu do zdarzenia 3,5, jeśli mieli negatywny (nieudany) lub pozytywny (cenzurowany) wynik PCR w dniu 3 lub 4. Prawdopodobieństwo pozytywnego wyniku PCR w dniu 3-4 zostało obliczone na podstawie funkcji przeżycia w czasie 3,5.

Wpływ leczenia na subiektywne nasilenie objawów oceniano za pomocą maksymalnego i średniego wyniku nasilenia. Średni wynik nasilenia objawów obliczono dla każdego uczestnika poprzez zsumowanie wyników nasilenia objawów dla wszystkich okresów sprawozdawczych od randomizacji do pierwszego okresu rozwiązania objawów, podzielonych przez liczbę okresów sprawozdawczych. Dzieci w wieku <24 miesięcy (n = 5) zostały wyłączone z analizy ciężkości choroby, ponieważ nie poproszono ich o zgłaszanie wszystkich objawów.

.