RNA-polymeras (Pol) I (ett av tre eukaryotiska nukleära RNA-polymeraser) är inriktat på transkriptionen av ribosomala DNA-gener, som finns i flera uppställda kopior i varje eukaryotisk cell. Dessa gener kodar för den stora ribosomala RNA-prekursorn, som sedan bearbetas till de tre största underenheterna av ribosomalt RNA, 18S-, 28S- och 5,8S-RNA. I mänskliga celler är rDNA-genklustren lokaliserade på den korta armen av de fem paren av de akrocentriska kromosomerna. Promotorn för rRNA har två viktiga och speciellt placerade sekvenser: ett CORE-element och ett uppströms kontrollelement (UCE, även kallat UPE). CORE-elementet i den mänskliga promotorn överlappar transkriptionens startplats, som sträcker sig från 20 till 45, och krävs för specifik initiering av transkriptionen.
Polymeraset är ett multisubenhetskomplex som består av två stora subenheter (de mest bevarade delarna inkluderar den katalytiska platsen som delar likhet med andra eukaryotiska och bakteriella multisubit RNA-polymeraser) och ett antal mindre subenheter. Under ett antal experimentella förhållanden är kärnan kompetent att förmedla ribonukleinsyrasyntesen, in vivo krävs dock ytterligare faktorer för att välja lämplig mall. Hos människor är RNA-transkriptet (45S) ungefär 13 000 nukleotider långt. Innan 45S rRNA lämnar kärnan som sammansatta ribosomala partiklar klyvs 45S rRNA för att ge en kopia av 28S rRNA, 18S rRNA och 5,8S rRNA vardera. Lika stora mängder av de tre rRNA:erna framställs genom att de initialt transkriberas som ett enda transkript.