Présentation du cas

Une femme de 43 ans souffrant d’anémie sévère après une splénectomie précédemment typée comme groupe sanguin A, Rh (D) négatif, a été adressée au laboratoire de référence en immunohématologie (IRL) de l’Organisation iranienne de transfusion sanguine (IBTO), Téhéran, Iran, pour un typage ABO / Rh(D) et un test de dépistage des anticorps avec une demande de deux unités de GR pour transfusion en décembre 2013. Les antécédents médicaux de la patiente ont révélé des avortements et des fausses couches récurrents sans antécédents de transfusion sanguine. Ses antécédents familiaux ont révélé que ses parents avaient un mariage consanguin et qu’elle avait quatre frères et sœurs, tous vivants sans aucun trouble sanguin suspecté, à l’exception d’un des frères qui a subi une splénectomie en raison d’une anémie sphérocytose héréditaire. Son seul enfant précédent était un garçon de 15 ans en bonne santé, qui a été testé et dont le phénotype Rhnull n’a pas été confirmé. Les paramètres de coagulation et d’hématologie étaient dans la gamme normale, à l’exception d’une hémoglobine très basse de 3,2 g/dL.

Il a été observé que le plasma sérique du patient a fortement réagi dans les cellules du panel d’anticorps, donnant 4 + macroscopique dans la phase 37℃ et dans la phase anti-globuline humaine. Le résultat du test d’autocontrôle était négatif. Le test direct anti-globuline (DAT) était positif (1+) avec un différentiel anti- IgG négatif et anti-C3d positif (1+).

Ces résultats suggéraient la présence d’allo-anticorps cliniquement significatifs contre de multiples antigènes négatifs ou un antigène à forte prévalence. Un résultat de test de dépistage d’anticorps était négatif pour le frère du patient. Un panel d’antigènes à trois cellules disponible et fabriqué à la maison (IBTO mini-panel) a été utilisé pour la procédure de dépistage des anticorps dans laquelle le plasma du patient a été ajouté à des GR sans enzyme papaïne en utilisant la solution saline à faible force ionique (LISS). Le mini-panel IBTO et le kit d’identification d’anticorps 11 cellules ainsi que les cellules sélectionnées ont été validés au cours de la période de deux ans en utilisant des kits Diamed commerciaux marqués CE. Le test de dépistage des anticorps a été effectué deux fois en parallèle en utilisant les kits produits par IBTO et les kits Diamed. Les résultats ont été comparés et en cas de résultats positifs, le panel d’identification d’anticorps 11 cellules de la société Diamed a été utilisé simultanément avec le panel d’identification d’anticorps 11 cellules IBTO. Le panel IBTO homemade antibody ID et les cellules sélectionnées ont été utilisés pour exclure et inclure les allo-anticorps.

La méthode d’agglutination en colonne avec carte de gel d’antiglobuline (INVITROGEL AHG coombs-Allemagne) a été utilisée pour le test de dépistage des anticorps. Les cartes de gel ont été incubées à 37 °C pendant 15 minutes, puis centrifugées pendant 10 minutes. Les méthodes standard en tube (Bio-Rad AHG- Allemagne) ont été utilisées pour l’identification des anticorps et les tests sur les cellules sélectionnées.

Les allo-anticorps cliniquement significatifs ont été définis comme les anticorps qui pourraient potentiellement causer la destruction des GR sur la base de la réactivité à 37 °C et/ou de la phase anti-globuline humaine (AHG).

Le phénotypage étendu de la patiente et de son frère a montré qu’ils étaient négatifs pour les antigènes RBC D, C, E, c, e, indiquant qu’ils étaient fortement suspects d’être le phénotype rare Rhnull.

Les études d’adsorption et d’élution en globuline anti-humaine (AHG, CE- Immunodiagnostika, Am Seerain 13 Allemagne, Eschelbronn) n’ont pas révélé la présence d’antigènes RBC D, C, E, c, e, dans le sang obtenu des deux patients. Nous avons effectué un phénotypage Rh avec deux sources d’antisérums (Diagast 251/AV.AVINEE- 59120 Loos, France et CE- Immunodiagnostika, Am Seerain 13 Allemagne, Eschelbronn). Des tests de contrôle positif et négatif ont été réalisés pour chaque antigène conformément aux recommandations du fabricant. Sur la base de ces résultats collectifs, nous avons interprété ces résultats comme étant fortement suggestifs du phénotype Rhnull avec un anti-Rh29 cliniquement significatif identifié dans le sérum de la patiente dont les données sont présentées dans le tableau 1.

Les tests de compatibilité ont montré que le sérum de la patiente n’était pas réactif avec son frère. Deux unités de GR ont été prélevées chez le frère dans une période de 10 jours. Elle a été transfusée avec les unités de GR et n’a jamais eu besoin de transfusion depuis cette date. Son frère a donné deux autres unités de GR en 2014 et 2015. La cryoconservation a également été utilisée pour une utilisation future.