Az eset bemutatása

A 43 éves nő súlyos vérszegénységben szenvedett lépeltávolítást követően, korábban A vércsoportú, Rh (D) negatív vércsoportú volt, beutalták az Iráni Vértranszfúziós Szervezet (IBTO) Immunohematológiai Referencia Laboratóriumába (IRL), Teherán, Irán, ABO / Rh(D) tipizálás és antitest szűrővizsgálat céljából, két egység vörösvértest transzfúzióra való kérésével 2013 decemberében. A beteg kórtörténetében visszatérő abortuszok és vetélések szerepeltek, vérátömlesztés nem volt a kórtörténetében. Családi anamnéziséből kiderült, hogy szülei vérszerinti házasságban éltek, és négy testvére volt, akik mindannyian életben voltak, és nem állt fenn vérrendellenesség gyanúja, kivéve az egyik testvért, akin örökletes spherocytosis anaemia miatt splenectomiát hajtottak végre. Egyetlen korábbi gyermeke egy egészséges tizenöt éves fiú volt, akit tipizáltak, és nem igazolták az Rhnull fenotípust. A véralvadási és hematológiai paraméterek a normál tartományban voltak, kivéve a nagyon alacsony, 3,2 g/dl-es hemoglobint.

Megfigyelték, hogy a beteg szérumplazmája erősen reagált az antitest panel sejtjeiben, 4 + makroszkópos eredményt adva a 37℃ fázisban és az anti-humán globulin fázisban. Az automatikus kontrollvizsgálat eredménye negatív volt. A közvetlen antiglobulin teszt (DAT) pozitív volt (1+), a differenciális anti-IgG negatív és az anti-C3d pozitív (1+).

Ezek az eredmények klinikailag jelentős alloantitestek jelenlétére utaltak több negatív antigén vagy egy magas prevalenciájú antigén ellen. A beteg testvérének antitest-szűrővizsgálati eredménye negatív volt. Az antitest-szűrési eljáráshoz egy házilag elérhető háromsejtes antigénpanelt (IBTO mini-panel) használtak, amelyben a beteg plazmáját papain enzim nélkül, alacsony ionerősségű sóoldat (LISS) segítségével adták a vörösvértestekhez. Az IBTO mini-3-sejtes panelt és az antitest-azonosító 11-sejtes készletet, valamint a kiválasztott sejteket két éven belül validálták a kereskedelmi CE-jelöléssel ellátott Diamed-készletekkel. Az antitest-szűrővizsgálatot kétszer párhuzamosan végeztük el az IBTO által gyártott készletekkel és a Diamed készletekkel. Az eredményeket összehasonlítottuk, és pozitív eredmény esetén a Diamed cég 11cells antitest-azonosító paneljét az IBTO 11cells antitest-azonosító paneljével egyidejűleg használtuk. Az IBTO házi készítésű antitest ID panelt és a kiválasztott sejteket az alloantitestek kizárására és bevonására használtuk.

Az antitest szűrővizsgálathoz antiglobulin gélkártyával (INVITROGEL AHG coombs-Germany) végzett oszlop agglutinációs módszert használtuk. A gélkártyákat 37 °C-on 15 percig inkubáltuk, majd 10 percig centrifugáltuk. Az antitestek azonosítására és a kiválasztott sejtek vizsgálatára standard csöves módszereket (Bio-Rad AHG- Németország) alkalmaztunk.

A klinikailag jelentős alloantitesteket úgy definiáltuk, mint olyan antitesteket, amelyek a 37 °C-os reaktivitás és/vagy az anti-humán globulin (AHG) fázis alapján potenciálisan RBC-destrukciót okozhatnak.

A beteg és testvére kiterjesztett fenotipizálása azt mutatta, hogy D, C, E, c, c, e RBC antigénekre negatívak voltak, ami azt jelezte, hogy erősen gyanús, hogy a ritka Rhnull fenotípushoz tartoznak.

Az anti-humán globulin (AHG, CE- Immunodiagnosztika, Am Seerain 13 Germany, Eschelbronn) adszorpciós és elúciós vizsgálatok nem mutatták ki D, C, E, c, e, RBC antigének jelenlétét a két betegtől nyert vérben. Rh-fenotipizálást végeztünk két forrásból származó antiszérával (Diagast 251/AV.AVINEE- 59120 Loos, Franciaország és CE- Immunodiagnostika, Am Seerain 13 Németország, Eschelbronn). Pozitív és negatív kontrollvizsgálatokat végeztünk minden antigén esetében a gyártó ajánlásainak megfelelően. Ezen együttes eredmények alapján úgy értelmeztük, hogy ezek az eredmények erősen az Rhnull fenotípusra utalnak, klinikailag szignifikáns anti-Rh29-et azonosítottunk annak a nőbetegnek a szérumában, akinek adatait az 1. táblázat tartalmazza.

A kompatibilitási vizsgálat kimutatta, hogy a női beteg széruma nem reagált a testvérével. A testvértől 10 napon belül két egység vörösvértestet gyűjtöttek. A nőnek az RBC-egységeket transzfundálták, és azóta nem volt szüksége transzfúzióra. A testvére 2014-ben és 2015-ben további két egység RBC-t adományozott. A későbbi felhasználás érdekében kriokonzerválást is alkalmaztak.