Fallpresentation

En 43-årig kvinna med allvarlig anemi efter en splenektomi hade tidigare blodgrupp A, Rh (D) negativ, hänvisades till immunohematologiskt referenslaboratorium (IRL) vid Iranian Blood Transfusion Organization (IBTO), Teheran, Iran för ABO/Rh(D)-typning och antikroppsscreeningtest med en begäran om två enheter RBC för transfusion i december 2013. Patientens anamnes avslöjade återkommande aborter och missfall utan anamnes på blodtransfusioner. Hennes familjehistoria avslöjade att hennes föräldrar hade ett samkönat äktenskap och att hon hade fyra syskon, alla levde utan någon misstänkt blodsjukdom, utom en av bröderna som genomgick en splenektomi på grund av ärftlig sfärocytosanemi. Hennes enda tidigare barn var en frisk femtonårig pojke, som typades och inte bekräftades som Rhnull-fenotyp. Koagulations- och hematologiparametrar var inom normalområdet, förutom ett mycket lågt hemoglobin på 3,2 g/dL.

Det observerades att patientens serumplasma reagerade starkt i antikroppspanelens celler, vilket gav 4 + makroskopiskt i 37℃-fasen och i anti-humanglobulinfasen. Resultatet av autokontrolltestet var negativt. Direkt anti-globulintest (DAT) var positivt (1+) med differentiellt anti-IgG negativt och anti-C3d positivt (1+).

Dessa resultat tyder på förekomst av kliniskt signifikanta alloantikroppar mot flera negativa antigener eller ett antigen med hög prevalens. Ett screeningtestresultat för antikroppar var negativt för patientens bror. En hemmagjord tillgänglig trecellig antigenpanel (IBTO-minipanel) användes för antikroppsscreeningförfarandet där patientens plasma tillsattes till RBC utan papainenzym med hjälp av saltlösning med låg jonisk styrka (LISS). IBTO mini-3cellspanelen och antikroppsidentifieringskitet 11cell och även utvalda celler validerades inom tvåårsperioden med hjälp av kommersiella CE-märkta Diamed-kit. Antikroppsscreeningstestet utfördes två gånger parallellt med hjälp av IBTO-tillverkade kit och Diamed-kit. Resultaten jämfördes och vid positiva resultat användes 11cells antikroppsidentifieringspanelen från Diamed Company samtidigt med IBTO:s 11cells antikroppsidentifieringspanel. IBTO:s egentillverkade antikropps-ID-panel och utvalda celler användes för att utesluta och inkludera alloantikroppar.

Kolonnagglutineringsmetoden med antiglobulingelkort (INVITROGEL AHG coombs-Germany) användes för antikroppsscreeningtestet. Gelkorten inkuberades vid 37 °C i 15 minuter och centrifugerades sedan i 10 minuter. Standardrörsmetoder (Bio-Rad AHG- Tyskland) användes för identifiering av antikroppar och utvalda celltester.

Kliniskt signifikanta alloantikroppar definierades som de antikroppar som potentiellt kan orsaka RBC-destruktion baserat på reaktivitet vid 37 °C och/eller anti-humanglobulin (AHG)-fasen.

Patienten och hennes bror utvidgad fenotypning visade att de var negativa för D, C, E, c, e RBC-antigen, vilket indikerade att de var starkt misstänkta för att vara den sällsynta Rhnull-fenotypen.

Adsorptions- och elutionsstudier i Anti-humanglobulin (AHG, CE- Immunodiagnostika, Am Seerain 13 Germany, Eschelbronn) avslöjade inte närvaron av D, C, E, c, e, RBC-antigen i blodet från båda patienterna. Vi utförde Rh-fenotypning med två källor av antisera (Diagast 251/AV.AVINEE- 59120 Loos, Frankrike och CE- Immunodiagnostika, Am Seerain 13 Germany, Eschelbronn). Positiva och negativa kontrolltester utfördes för varje antigen enligt tillverkarens rekommendationer. På grundval av dessa samlade resultat tolkade vi dessa resultat som att de starkt tyder på Rhnull-fenotypen med en kliniskt signifikant anti-Rh29 identifierad i serum från den kvinnliga patienten vars uppgifter visas i tabell 1.

Kompatibilitetstester visade att serum från den kvinnliga patienten inte var reaktivt med hennes bror. Två enheter RBC samlades in från brodern inom en 10-dagarsperiod. Hon transfunderades med RBC-enheterna och behövde aldrig någon transfusion sedan dess. Hennes bror donerade ytterligare två enheter RBC under 2014 och 2015. Kryokonservering utnyttjades också för framtida användning.