Proteina hepatică de transfer al a-Tocoferolului și reglarea nivelurilor serice

a-TTP a fost identificată pentru prima dată în 1977 (11) și s-a demonstrat că transferă a-tocoferol între lipozomi și microsomi (12). În prezent, se crede că a-TTP este proteina hepatică care recunoaște RRR-a-tocoferolul din chilomicronii care intră și reglează în mod preferențial resecreția acestuia în VLDL-urile derivate din ficat (13). A-TTP hepatică a fost izolată, iar secvențele sale complementare de ADN au fost raportate la o varietate de specii, inclusiv la om, șoarece, șobolan, câine și vacă. Proteina umană, care codifică 238 de aminoacizi, are o homologie de 94% cu proteina de șobolan și o oarecare homologie cu proteina de legare a retinaldehidei din retină și cu sec14, o proteină de transfer a fosfolipidelor (14). Gena umană a fost secvențiată și localizată la 8q13. 1-13.3 din cromozomul 8 (14,15). a-TTP a fost cristalizată de două grupuri diferite (16,17). Structura include un buzunar de legare a a-tocoferolului, care are o balama și un capac care se închide prinzând a-tocoferolul.

Deși expresia a-TTP a fost raportată pentru prima dată ca fiind limitată la hepatocite (18), ARN mesager (ARNm) a-TTP a fost, de asemenea, detectat în creierul de șobolan, splină, plămân și rinichi (19), iar proteina a-TTP a fost detectată în creierul uman (20). Mai mult, a-TTP este prezentă în uterul șoarecilor gestanți și în placenta umană (21,22), ceea ce sugerează că aceasta are rolul de a asigura transferul adecvat de a-tocoferol către făt în timpul sarcinii. De fapt, expresia ARNm a-TTP placentară a fost a doua după cea din ficat (23). De asemenea, s-a raportat că a-TTP a fost localizată nu numai în citosol, ci a fost localizată predominant în nucleele trofoblastului și în endoteliul capilarelor fetale.

Mecanismul celular prin care a-TTP facilitează secreția preferențială de a-tocoferol în plasmă de către ficat nu a fost clarificat. Chilomicronii bogați în trigliceride și VLDL-urile și LDL-urile care transportă vitamina E sunt preluate de ficat prin endocitoză mediată de receptori. Horiguchi și colaboratorii (24) sugerează că a-TTP se translocă din citosol în endosomi pentru a obține a-tocoferol, iar apoi complexul a-TTP/a-tocoferol se deplasează către membrana plasmatică, unde a-tocoferolul este eliberat în membrană pentru a fi preluat de lipoproteinele circulante, în special VLDL. Zha și colegii săi (25) au raportat că proteina casetă A1 (ABCA1) de legare a trifosfatului de adenozină (ATP) din endosomi joacă, de asemenea, un rol în endocitoză, acționând ca o flipază pentru a transloca fosfatidil serina către membrana externă și pentru a potența înmugurirea membranei. Deoarece ABCA1 poate transfera, de asemenea, a-tocoferol (26), ABCA1 ar putea îmbogăți membrana exterioară a veziculelor endocitare cu a-tocoferol; apoi a-TTP ar putea îndepărta preferențial RRR-a-tocoferol de pe frunza exterioară a membranei endosomale pentru a-l transfera la membrana plasmatică. Rămâne de clarificat dacă ABCA1 participă la transferul de a-tocoferol direct către și de la a-TTP, așa cum au sugerat Horiguchi și colaboratorii (24), sau dacă și alte proteine sunt implicate în traficul de a-tocoferol.

Acum se pare că afinitatea a-TTP pentru analogii de vitamina E este unul dintre factorii determinanți critici pentru concentrațiile plasmatice ale diferitelor forme de vitamina E (27). a-TTP are cea mai mare afinitate pentru RRR-a-tocoferol (100%), urmată de -tocoferol (38%), γ-tocoferol (9%), d-tocoferol (2%), acetat de a-tocoferol (2%), chinonă de a-tocoferol (2%), SRR-a-tocoferol (11%), a-tocotrienol (12%) și trolox (9%) (27). Dovada importanței acestei proteine în reglarea nivelurilor plasmatice provine de la șoarecii knock-out și de la oamenii cu o deficiență genetică a acestei proteine. La șoarecii knockout a-TTP, concentrațiile plasmatice și tisulare de a-tocoferol sunt între 2% și 20% din cele ale șoarecilor de control (28,29), iar șoarecilor le lipsește capacitatea de a face distincția între RRR-a-tocoferolul natural și a-tocoferolul sintetic, all-rac-a-tocoferol (28). De la jumătatea anilor 1980, s-a constatat că mai multe zeci de pacienți cu constatări neurologice compatibile cu deficiența de vitamina E au niveluri plasmatice scăzute, dar fără dovezi de malabsorbție a grăsimilor (30,31). Acești pacienți cu „ataxie cu deficit de vitamina E” (AVED) au fost incapabili să mențină concentrații plasmatice normale de a-tocoferol fără suplimentarea cu doze orale mari de vitamina E. Deși au avut o absorbție intestinală normală a vitaminei E, nu au fost capabili să secrete a-tocoferol din ficat în VLDL (9) și nu au fost capabili să discrimineze între formele de vitamina E (32). Ulterior, s-a demonstrat că AVED este rezultatul unor mutații homozigote în gena care codifică pentru a-TTP (31,33). Astfel, mutațiile genetice ale a-TTP la om și manipularea genei la șoareci demonstrează în mod concludent importanța a-TTP în reglarea concentrațiilor serice normale de vitamina E.

O proteină citosolică suplimentară care reglează concentrațiile tisulare de a-tocoferol a fost identificată în ficatul bovin ca fiind proteina asociată tocoferolului (TAP) de 46 kDa (34). Ulterior, omologul uman, hTAP, a fost clonat (35). hTAP se exprimă cel mai mult în ficat, creier și prostată (35). S-a constatat că TAP este identică cu factorul proteic supernatant (SPF) (35,36), care îmbunătățește sinteza colesterolului prin stimularea conversiei squalenei în lanosterol (36). Interesantă a fost constatarea că TAP/SPF uman complexează cu RRR-a-tocoferilchinona, produsul de oxidare al a-tocoferolului (37), sugerând un rol potențial în reglarea catabolismului tocoferolului. Funcția fiziologică a TAP/SPF rămâne în curs de cercetare.

.