Prezentare caz

O femeie în vârstă de 43 de ani cu anemie severă în urma unei splenectomii, tipizată anterior ca fiind grupa sanguină A, Rh (D) negativ, a fost trimisă la Laboratorul de referință pentru imunohematologie (IRL) al Organizației Iraniene de Transfuzie Sanguină (IBTO), Teheran, Iran, pentru tipare ABO / Rh (D) și test de depistare a anticorpilor, cu o cerere de două unități de hematii pentru transfuzie în decembrie 2013. Istoricul medical al pacientului a relevat avorturi recurente și avorturi spontane fără antecedente de transfuzii de sânge. Anamneza familială a arătat că părinții ei au avut o căsătorie consangvină și a avut patru frați, toți erau în viață fără nicio tulburare de sânge suspectată, cu excepția unuia dintre frați care a suferit o splenectomie din cauza anemiei ereditare cu sferocitoză ereditară. Singurul ei copil anterior a fost un băiat sănătos în vârstă de 15 ani, care a fost tipizat și nu a fost confirmat ca fiind de fenotip Rhnull. Parametrii de coagulare și hematologici erau în limite normale, cu excepția hemoglobinei foarte scăzute de 3,2 g/dL.

S-a observat că plasma serică a pacientului a reacționat puternic în celulele panoului de anticorpi, dând 4 + macroscopic în faza 37℃ și în faza de globulină antiumană. Rezultatul testului de autocontrol a fost negativ. Testul direct anti-globulină (DAT) a fost pozitiv (1+) cu anti IgG diferențial negativ și anti-C3d pozitiv (1+).

Aceste rezultate au sugerat prezența unor aloanticorpi semnificativi din punct de vedere clinic împotriva mai multor antigene negative sau a unui antigen cu prevalență ridicată. Rezultatul unui test de depistare a anticorpilor a fost negativ pentru fratele pacientului. Pentru procedura de depistare a anticorpilor a fost utilizat un panel de antigeni cu trei celule disponibil în casă (IBTO mini-panel), în care plasma pacientului a fost adăugată la eritrocite fără enzima papaina, folosind soluția salină cu putere ionică scăzută (LISS). Panoul IBTO mini-3celule și kitul de identificare a anticorpilor 11celule și, de asemenea, celulele selectate au fost validate în perioada de doi ani cu ajutorul kiturilor comerciale Diamed marcate CE. Testul de depistare a anticorpilor a fost efectuat de două ori în paralel, utilizând kiturile produse de IBTO și kiturile Diamed. Rezultatele au fost comparate și, în cazul în care rezultatele au fost pozitive, panoul de identificare a anticorpilor 11celule de la Diamed Company a fost utilizat simultan cu panoul de identificare a anticorpilor 11celule de la IBTO. Pentru excluderea și includerea aloanticorpilor au fost utilizate panoul IBTO de identificare a anticorpilor produs de IBTO și celulele selectate.

Pentru testul de screening al anticorpilor a fost utilizată metoda aglutinației pe coloană cu card de gel antiglobulină (INVITROGEL AHG coombs-Germania). Cartelele de gel au fost incubate la 37 °C timp de 15 minute, apoi au fost centrifugate timp de 10 minute. Pentru identificarea anticorpilor și pentru testele cu celule selectate s-au utilizat metode standard de testare în tuburi (Bio-Rad AHG- Germania).

Aloanticorpii semnificativi din punct de vedere clinic au fost definiți ca fiind acei anticorpi care ar putea provoca potențial distrugerea RBC pe baza reactivității la 37 °C și/sau a fazei de globulină antiumană (AHG).

Fenotiparea extinsă a pacientei și a fratelui ei a arătat că au fost negativi pentru antigene D, C, E, c, e, RBC, ceea ce indică faptul că au fost puternic suspectați de a fi fenotipul rar Rhnull.

Studiile de adsorbție și eluție în Anti-human globulin (AHG, CE- Immunodiagnostika, Am Seerain 13 Germany, Eschelbronn) nu au relevat prezența antigenelor D, C, E, c, e, RBC în sângele obținut de la ambii pacienți. Am efectuat fenotiparea Rh cu două surse de antiseruri (Diagast 251/AV.AVINEE- 59120 Loos, Franța și CE- Immunodiagnostika, Am Seerain 13 Germania, Eschelbronn). S-au efectuat teste de control pozitiv și negativ pentru fiecare antigen, în conformitate cu recomandările producătorului. Pe baza acestor constatări colective, am interpretat aceste rezultate ca fiind puternic sugestive pentru fenotipul Rhnull, cu un anti-Rh29 semnificativ din punct de vedere clinic identificat în serul pacientei de sex feminin ale cărei date sunt prezentate în tabelul 1.

Testul de compatibilitate a arătat că serul de la pacienta de sex feminin a fost nereactiv cu fratele ei. Două unități de hematii au fost recoltate de la fratele său într-o perioadă de 10 zile. Ea a fost transfuzată cu unitățile de hematii și nu a mai avut nevoie de nicio transfuzie de la acea dată. Fratele ei a mai donat încă două unități de RBC în 2014 și 2015. S-a utilizat, de asemenea, crioprezervarea pentru utilizare ulterioară.

.